Increased oxidative stress with aging reduces chondrocyte survival: correlation with intracellular glutathione levels
Marcello Del Carlo Jr 1, Richard F Loeser
Arthritis Rheum. 2003 Dec;48(12):3419-30.
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https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14673993/
Resumen
Objetivo: Examinar el papel del estrés oxidativo en la mediación de la muerte celular en condrocitos aislados del cartílago articular de donantes de tejido humanos adultos jóvenes y ancianos.
Métodos: Se evaluó la muerte celular inducida por el oxidante SIN-1 en el sistema de cultivo de perlas de alginato utilizando sondas fluorescentes para evaluar la integridad de la membrana. La generación de peroxinitrito por descomposición de SIN-1 se confirmó mediante inmunotinción positiva de las células tratadas para 3-nitrotirosina. Las determinaciones de Glutatión oxidado (GSSG) y Glutatión reducido (GSH) se realizaron en cultivos monocapa utilizando un ensayo de reciclaje de enzimas. Las células se agotaron en Glutatión intracelular mediante la adición de DL-butionina- (S, R) -sulfoximina o mediante la eliminación de L-cistina del medio de cultivo. La actividad de las enzimas antioxidantes celulares se determinó espectrofotométricamente mediante la descomposición del sustrato de la mezcla de reacción.
Resultados: Más condrocitos (> 2 veces) de donantes viejos (> / = 50 años) murieron después de la exposición a SIN-1 1 mM en comparación con los derivados de donantes jóvenes (18-49 años). Aunque la producción autocrina del factor de crecimiento similar a la insulina 1 (IGF-1) promueve la supervivencia de los condrocitos, el pretratamiento con IGF-1 no pudo prevenir la muerte celular inducida por la exposición a SIN-1. Las células aisladas de donantes antiguos tenían una proporción más alta de Glutatión oxidado a Glutatión reducido. La glutatión reductasa es la principal enzima involucrada en la regeneración de Glutatión reducido a partir de Glutatión oxidado. El tratamiento de condrocitos con SIN-1 para inducir estrés oxidativo in vitro resultó en la disminución de la actividad de la glutatión reductasa y tiorredoxina reductasa, pero no de la catalasa. Las células agotadas de glutatión intracelular eran más susceptibles a la muerte celular inducida por SIN-1.
Conclusión: Estos resultados proporcionan evidencia de que el aumento del estrés oxidativo con el envejecimiento hace que los condrocitos sean más susceptibles a la muerte celular mediada por oxidantes a través de la desregulación del sistema antioxidante del Glutatión. Esto puede representar un factor importante que contribuye al desarrollo de la osteoartritis en los adultos mayores.
Fuente: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14673993/
